Главная > Дизайн ногтей > Хламидии микробиология. Биологические свойства хламидий


Хламидии микробиология. Биологические свойства хламидий




Хламидии (Chlamydia) -- мелкие грамотрицательные кокковидные бактерии, размером 250-1500нм (0,25-1 мкм). Они имеют все основные признаки бактерий: содержат два типа нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), рибосомы, мурамовую кислоту (компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий), размножаются бинарным делением и чувствительны к некоторым антибиотикам.

В 1966 году на 9-м Международном съезде микробиологов хламидии были исключены из класса вирусов.

Таксономия

Все хламидии сгруппированы в порядок Chlamydiaceae , род Chlamydia , последний включает четыре вида:

  1. Chlamydia trachomatis (Хламидия трахоматис) .
  2. Chlamydia psittaci .
  3. Chlamydia pneumonia .
  4. Chlamydia pecorum .
  • Chlamydia psittaci – вызывает у человека атипичную пневмонию, энцефаломиокардит, артрит, пиелонефрит.
  • Chlamydia pecorum описана недавно, изолирована от животных-овец, крупного рогатого скота. Имеет сходство с Chlamydia psittaci . Роль в патогенезе заболеваний человека неизвестна.
  • Chlamydia pneumoniae вызывает у взрослых острые респираторные заболевания и мягкую форму пневмонии.
  • Вид Chlamydia trachomatis встречается только у человека, в ней выявлены 18 антигенных вариантов (серотипов).
    Серотипы А,В,С -- возбудители трахомы. Переносчиками являются насекомые, основной путь заражения -- попадание инфекционного агента посредством втирания в область слизистой оболочки глаза. Образующиеся в результате развития инфекционного процесса рубцы ведут к потере зрения. Серотипы L1-L3 размножаются в лимфоидной ткани и являются возбудителями тропической венерической болезни Lymphogranuloma venerum. В случае серотипов от D до К -- заражение происходит при половом контакте, значительно реже -- при втирании, новорожденный при родах заражается от инфицированной матери.

Физиология и патогенез

Жизненный цикл хламидий существенно отличается от бактерий.

Хламидии существуют в двух формах, различающихся по морфологическим и биологическим свойствам. Высокоинфекционной, спороподобной, внеклеточной формой является элементарное тельце (ЭТ), и вегетативной, репродуцирующейся, внутриклеточной -ретикулярное тельце (РТ).

ЭТ имеет вид сферы диаметром 0,15-0,2 мкм. РТ имеет структуру типичных грамотрицательных бактерий размером около 1 мкм (См. рис1.). В ЭТ содержится больше дисульфидных связей, что позволяет им противостоять осмотическому давлению.

Первый этап инфекционного процесса -- адсорбция ЭТ на плазмалемме чувствительной клетки хозяина. Важную роль на этом этапе играют электростатические силы. Внедрение хламидий происходит путем эндоцитоза. Инвагинация участка плазмалеммы с адсорбированным ЭТ происходит в цитоплазму с образованием фагоцитарной вакуоли. Эта фаза занимает 7-10 часов. После этого уже в клетке в течение 6-8 часов происходит реорганизация ЭТ в вегетативную форму-ретикулярное тельце, способное к росту и делению. Именно на этой фазе эффективно курсовое применение антибактериальных препаратов, поскольку ЭТ к ним не чувствительно.

Размножение хламидий ведет к формированию включений, известных под названием телец Провачека. В течение 18-24 часов развития они локализованы в цитоплазматическом пузырьке, образованном из мембраны клетки хозяина. Во включении может содержаться от 100 до 500 хламидий. Остановка процесса на этой стадии ведет к персистенции хламидийной инфекции. Далее начинается процесс созревания ретикулярных телец через переходные (промежуточные) тельца в течение 36-42 часа развития в ЭТ следующего поколения. Полный цикл репродукции хламидии равен 48-72 часам и завершается разрушением пораженной клетки, в случае возникновения для хламидии неблагоприятных метаболических условий этот процесс может затягиваться на более длительный период.

Хламидии могут высвобождаться из инфицированной клетки через узкий ободок цитоплазмы. При этом клетка может сохранять жизнеспособность, этим можно объяснить бессимптомность течения хламидийной инфекции.

Защитная реакция на начальной стадии инфекции осуществляется полиморфоядерными лимфоцитами. Существенную роль в защите организма играет поликлональная активация В-лимфоцитов. В сыворотке крови и секреторных жидкостях при хламидиозе обнаруживают значительное количество иммуноглобулинов IgG, IgМ, IgA. Однако ведущую роль в защите от хламидийной инфекции занимают Т-хелперы, активирующие фагоцитарную активность макрофагов.

Ультраструктура

Использование методов ультраструктурного анализа позволило доказать возможность персистирования хламидий в эпителиальных клетках и фибробластах инфицированных слизистых мембран. Хламидии поглощаются периферическими моноцитами и распространяются в организме, моноциты оседают в тканях и превращаются в тканевые макрофаги (в суставах, в сосудах, в области сердца). Тканевые макрофаги могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких месяцев, являясь при этом мощным антигенным стимулятором, приводя к образованию фиброзных гранулем в здоровой ткани. Хламидии или их фрагменты могут высвобождаться из клеток и вызывать образование специфических антител, независимо от того, определяется ли хламидийный антиген в месте проникновения инфекции.

Структура клеточной стенки хламидии соответствует общему принципу построения грамотрицательных бактерий (рис. 2). Она состоит из внутренней цитоплазматической и наружной мембран (обе являются двойными, обеспечивая прочность клеточной стенки). Антигенные свойства хламидий определяются внутренней мембраной, которая представлена липополисахаридами. В нее интегрированы так называемые белки наружной мембраны (Outer membrane proteins-OMP). На основной белок наружной мембраны-Major Outer Membrane Protein (MOMP) приходится 60% общего количества белка. Оставшаяся антигеннная структура представлена белками наружной мембраны второго типа -- ОМР-2.

Антигены

Все хламидии имеют общий групповой, родоспецифичный антиген (липополисахаридный комплекс, реактивной половиной которого является 2-кето-3-дезоксиоктановая кислота), используемый при диагностике заболевания иммунофлюоресцентными методами со специфическими антителами.

Белки МОМР и ОМР-2 содержат видо- и серотипоспецифические эпитопы. Однако в них имеются также области с высоким сходством среди видов (родоспецифические эпитопы), что обуславливает возможность появления перекрестных реакций. Основной белок клеточной мембраны и богатые цистеинами другие белки связаны дисульфидными связями. Обнаружено пять генов дисульфид- связанных изомераз, возможно играющих роль в реструктуризации цистеинбогатых белков при дифференциации элементарных телец в ретикулярные. У Сhl. trachomatis выявлено 9 генов, кодирующих поверхностные мембранные белки, у Chlamydia р neumonia –18.

Таблица 1. Антигены хламидий (по Mardh P., 1990)

Генетика

В 1998 году Stephens et. al. сообщили о секвенировании генома Chlamydia trachomatis . Геном хламидии имеет небольшой размер и составляет не более 15% генома кишечной палочки. Он состоит из хромосомы, содержащей 1042519 пар оснований (58,7%) и плазмиды, имеющей в своем составе 7493 пар оснований.

Анализ генома позволил выделить 894 гена, кодирующих различные белки. Сходство с ранее исследованными белками других бактерий позволило определить функциональное назначение 604 (68%) кодируемых белков. 35 (4%) белков были схожи с белками, имеющимися у других бактерий. В оставшихся 255 (28%) белках последовательности были непохожи на ранее изученные. Анализ белковых последовательностей показал, что 256 (29%) хламидийных белков группируются в 58 семейств в пределах генома подобно группированию белков у бактерий с небольшим геномом, таких как микоплазмы и Haemophilus influenzae .

Патогенные хламидии, особенно С. trachomatis, довольно часто вызывают острые или хронические воспаления уретры, влагалища, шейки матки. Урогенитальный хламидиоз протяжении последнего десятилетия встречается чаще, чем сифилис и гонорея. Основной путь передачи заболевания - половой, реже - бытовой.Материалом для лабораторного исследования служат соскобы со слизистой уретры у мужчин и женщин и соскобы с шейки матки у женщин. Украинских НД1 дерматологии и венерологии разработал унифицированные методы диагностики мочеполовых хламидиозов. Среди них важное значение имеют экспресс-методы, выявление морфологических структур и антигенов хламидий в исследуемом материале, выделение хламидий в культурах клеток, выявление хламидийных антител с помощью серологических реакций и полимеразная цепная реакция.

Экспресс-методы

Ряд фирм СЕЛА и Франции разработали специальные диагностические тесты для проведения имунохроматографичных экспресс-методов, которые могут выдать результат через 10-30 мин. Однако их чувствительность и специфичность значительно меньше, чем при проведении полномасштабных исследований.

Микроскопические методы

Исследуемый материал берут у больных, которые в течение месяца не должны принимать антибиотики. Соскобы делают одноразовым зондом (щеточкой, ложечкой Фолькмана, жолобкуватим зондом). Инфекционный материал наносят на поверхность 8 мм ямки специального предметного стекла. Мазок высушивают 20-30 мин и фиксируют в холодном ацетоне в течение 5-10 мин, окрашивают по методу Романовского-Гимза 35-40 мин, обрабатывают подкисленным этанолом (3-5 капель ледяной уксусной кислоты на 15-20 мл спирта) в течение 5-10 с, промывают водой, высушивают и микроскопируют. Ретикулярные тельца окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а элементарные тельца - в розово-красный. Зернистые структуры хламидий располагаются вблизи ядра. Выявление 5-10 типичных включений имеет диагностическое значение.Антигены хламидий в инфекционном материале обнаруживают с помощью прямой и непрямой реакции иммунофлюоресценции. Суть прямого метода заключается в соединении меченных флуорохромом антител с хламидийным антигеном и выявлении специфического свечения при люминесцентной микроскопии. Люминесцентная антихламидийну сыворотка производится в Харькове. Есть много иностранных диагностических систем для проведения этого метода.Суть косвенного метода заключается в соединении комплекса антиген + немеченых хламидийные антитела с видовой (антиглобулиновою) меченой флуоресцеин сывороткой.Кроме микроскопических методов, антигены хламидий в инфекционном материале можно обнаружить с помощью иммуноферментного анализа. Принцип метода заключается во взаимодействии моноклональных хламидийных антител, адсорбированных на твердой фазе, с антигеном хламидий, находящегося в исследуемом материале, и образовании иммунных комплексов. Материалом для анализа могут быть соскобы со слизистых оболочек, центрифугат моче, секретах, биоптаты подобное.Уже разработаны и внедрены в практику много диагностических тест-систем для ИФА. Исследуемый материал вносят на адсорбированные в лунках планшеты антитела. Оценка результатов проводится с помощью иммуноферментного анализатора согласно инструкции к каждой тест-системы. Чувствительность ИФА для выявления хламидий колеблется в пределах 50-70% у мужчин и 88-100% у женщин.

Выделение хламидий в культурах клеток

Наиболее точным и доказательным методом диагностики хламидиоза является выделение возбудителя на культуре клеток (золотой стандарт). Чаще всего используют культуры клеток L-929, McCoy, Hela, ВНК-21. В стерильные плоскодонные пробирки диаметром 14 мм вносят на дно покрывных стекла, добавляют по 1 мл клеточной суспензии в питательной среде (1-Ю5 клеток / мл) и ставят на 24-48 ч в термостат при 37 ° С для образования монослоя клеток на покрывных стеклах. Затем среду выливают, вносят инфекционный материал, обработанный антибиотиками, центрифугированные течение часа при 3000 об / мин, инкубируют в термостате 2 часа при 37 ° С. Исследуемый материал выливают, заменяют его свежим питательной средой, инкубируют в термостате 48-72 час. Покрывных стекла с монослоем клеток вынимают, фиксируют 10 мин метанолом, промывают фосфатным буфером и окрашивают по методу Романовского-Гимза. Покрывных стекла монтируют на предметном стекле монослоем клеток вниз в канадском бальзаме.Во иммерсионным объективом выявляют наличие цитоплазматических включений. Элементарные тельца хламидий окрашиваются в красный, а ретикулярные тельца - в синий цвет.При обработке препаратов флуоресцентными антителами монослой клеток также монтируют на предметном стекле в глицерине и исследуют с помощью люминесцентного микроскопа. Метод высокоспецифичным (100%) и чувствительный (75%), но достаточно сложный, дорогой, результат получают через 72-96 час. Кроме того, велик риск заражения персонала. Для практических лабораторий он еще малодоступен.

Иммунологическая диагностика

В современной практике серологических исследований мочеполовых хламидиозов используют 4 иммунологические реакции: непрямой иммунофлюоресценции, непрямой гемагглютинации, связывания комплемента и метод иммуноферментного анализа. Материалом для исследования во всех 4-х реакциях является сыворотка крови больных, секреты половых желез.С целью выявления хламидийных антител в реакции непрямой иммунофлюоресценции применяют специфический хламидийный антиген, который обеспечивает реакции с антителами ко всем вариантам С. trachomatis.При постановке этой реакции на предметном стекле готовят слайд-антигены. Стекло помещают на трафарет с указанием зон нанесения антигенов (контрольного и специфического). Слайды высушивают 15-20 мин и фиксируют в охлажденном ацетоне. Затем на слайд-антигены наносят соответствующие разведения сыворотки, инкубируют 40 мин при 37 ° С во влажной камере. После этого препарат трижды промывают фосфатным буферным раствором, добавляют антивидовой люминесцирующих сыворотку еще раз выдерживают 40 мин во влажной камере и снова трижды промывают. Высушенные слайды исследуют под люминесцентным микроскопом. Технику постановки реакции выполняют инструкции, прилагаемой к каждой диагностической тест-системы.Оценку результатов проводят по степени специфической флуоресценции комплексов элементарных и ретикулярных телец с антителами, используя классическую чотириплюсову систему. Титром хламидийных антител сыворотки больного считают то больше ее разведения, при котором наблюдается четкое ярко-зеленое свечение не менее, чем на 2 +. При хламидийных поражениях мочеполовой системы он равен 1:64 и выше. Постановка РИФ методом парных сывороток должна выявить нарастание титра антител в 4 раза от исходного уровня.Рекцию непрямой гемагглютинации используют, в основном, для диагностики зоонозных хламиде иозив и первичного серологического скрининга заболеваний у людей.Реакция связывания комплемента позволяет выявить антитела к родоспецифичного антигена хламидий. Ставят ее по обычной схеме. Диагноз считают положительным при титре комплементсвязывающих антител 1:64 и выше. РСК мало подходит для диагностики хламидийных инфекций генитальной системы.Выявление хламидийных антител иммуноферментным методом базируется на взаимодействии антигена с хламидий на поверхности лунок полистирилових планшет с IgM и IgG в сыворотках больных людей. Уже изготовлена большое количество диагностических наборов.Сначала сыворотку больного разводят во вспомогательном ряду пробирок, затем проводят сорбцию антител в лунках микротитровального планшета. Подробная методика постановки ИФА изложена в инструкции, прилагаемой к диагностической тест-системы. ИФА рекомендуют ставить с помощью парных сывороток. Оценку результатов осуществляют с помощью иммуноферментного анализатора по величине оптической плотности растворов в лунках полистирилового планшета.

Урогенитальный хламидиоз – одно из са­мых распространенных (после трихомонадной инфекции) заболеваний, передающихся половым путем. Это – острое или хро­ническое инфекционное заболевание, ко­торое характеризуется преимущественным поражением мочеполового тракта, обычно малосимптомным течением, но тяжелыми последствиями – развитием бесплодия.

Эпидемиология. Урогенитальный хламиди­оз – антропонозная инфекция: ее источником служат больные люди (хламидий не являются представителями нормальной микрофлоры, поэтому их обнаружение у здоровых людей яв­ляется доказательством хронического бессимптомного течения хламидиоза). Как источник инфекции наиболее опасны женщины, у ко­торых бессимптомное течение заболевания отмечается в 70 – 80% случаев. Заражение че­ловека происходит через слизистые оболочки половых путей. Основной механизм зараже­ния – контактный, путь передачи – по­ловой. Однако возможно инфицирование и через различные предметы (белье, мочалка и др.). Описаны случаи семейного хламидиоза, возникшего в результате контактно-бытового инфицирования. Новорожденные могут зара­жаться от больной матери при прохождении через родовые пути (хламидиоз глаз, отиты, атипичные пневмонии хламидийной этиоло­гии). Возможна также трансплацентарная пе­редача возбудителя от матери плоду в процес­се его внутриутробного развития (неонатальная патология – врожденный хламидиоз).

Генитальные серовары Chlamydia trachomatis могут попасть на слизистую оболочку глаз также при купании, в результате чего раз­вивается кератоконъюнктивит («хламидиоз бассейнов»). Хламидийный конъюнктивит обычно является односторонним процессом и носит название «паратрахома».

Восприимчивость к болезни высокая. Полагают, что около 6-9% мужчин и 12-15% женщин в мире заражены хламидиями.

Патогенез и клиника . Входные ворота инфек­ции – как правило, слизистые оболочки половых органов. Патологический процесс начинается через 5 – 30 дней после заражения. У женщин пер­воначально поражается шейка матки. У мужчин Chlamydia trachomatis первично инфицирует эпи­телий уретры. Урогенитальный хламидиоз часто называют «негонококковый уретрит», так как у больных отмечаются симптомы, напоминающие гонорею: зуд, выделения, боль при мочеиспус­кании. Однако эти признаки менее выражены, чем при гонорее. Далее развивается восходящая инфекция, которая у женщин клинически про­является развитием цервицита, уретрита, эндо­метрита, сальпингита. У мужчин в результате хламидийной инфекции возникает эпидидимит, простатит. Воспалительный процесс в орга­нах малого таза приводит к образованию спаек и рубцов, следствием чего является развитие непроходимости маточных труб у женщин, се­менных протоков у мужчин. Финалом воспалительных заболеваний малого таза хламидийной этиологии является развитие внематочной бе­ременности у женщин, а также формирование женского и мужского бесплодия.

В некоторых случаях хламидийный уретрит может осложниться развитием экстрагенитальных осложнений и привести к болезни Рейтера. Полагают, что в основе патогенеза этого заболе­вания лежит аутоиммунный механизм. Показано, что выделяемый хламидиями при хроническом течении заболевания белок теплового шока схо­ден по своему аминокислотному составу с челове­ческим. Накапливаясь в организме человека, этот белок может запускать аутоиммунные процессы, приводящие к развитию реактивных артритов, синовиитов нижних конечностей, асептическому уретриту и конъюнктивиту с полиморфным пора­жением кожи и слизистых оболочек. Кроме того, С. trachomatis, вероятно, стимулирует выработку антиспермальных антител. Синдром Рейтера, не­редко наблюдаемый у мужчин, сочетает в себе триаду признаков: уретрит – конъюнктивит – реактивный артрит (это так называемый уретроокулосиновиальный синдром).

Хламидии могут также вызывать воспали­тельные реакции в прямой кишке. Нередко наблюдается сочетание урогенитального хламидиоза с гонореей, трихомониазом или дру­гими заболеваниями, передающимися поло­вым путем (ЗППП).

Иммунитет . При урогенитальном хламидиозе имеет преимущественно клеточный характер. В сыворотке крови инфицированных людей могут быть обнаружены специфические антихламидийные антитела, однако они не защи­щают от повторного заражения, так как не яв­ляются протективными. После перенесенного заболевания иммунитет не формируется.

Микробиологическая диагностика. При забо­леваниях глаз применяют бактериоскопический метод – в соскобах с эпителия конъюнктивы или роговицы выявляют внутриклеточные включения (тельца Н-Р). При этом следует исследовать имен­но соскобы, а не мазки, так как для обнаружения типичных включений необходимо использовать большое количество клеток. При урогенитальном хламидиозе обнаружить хламидии в клетках эпи­телия мочеполового тракта удается крайне редко.

Для выявления антигена хламидии в пора­женных клетках применяют РИФ.

При поражении мочеполового тракта может быть применен биологический (культуральный) метод, основанный на заражении ис­следуемым материалом (соскобы эпителия из уретры, влагалища, шейки матки, биоптат из половых органов) культуры клеток. Культуру клеток (например, типа McCoy) предвари­тельно обрабатывают циклогексамидом.

Постановка РИФ, ИФА, иммунохроматографический метод позволяют обнаружить антигены хламидии в исследуемом материале. С этой же целью применяют ПЦР, ДНК-гибридизацию.

Серологический метод, направленный на обнаружение специфических антихламидийных антител в парных сыворотках крови боль­ного с помощью РПГА, РСК, ИФА, применя­ют редко, так как титры этих антител весьма малы. Серологический метод исследования может быть использован для обнаружения IgM против С. trachomatis при диагностике пневмонии новорожденных.

Лечение. Комплексное. Назначают антибиоти­ки с направленной фармакокинетикой, которые способны длительно сохраняться внутри клеток. Наиболее эффективен с этой точки зрения азитромицин из группы макролидов. В связи с тем, что хламидии лишены полноценного пептидогликана, недопустимо использование р-лактамов. Одновременно с антибиотиками назначают иммуномодуляторы, эубиотики (лактобактерин в свечах или в виде аппликаций, местно), а также местные антисептические средства.

Профилактика. Только неспецифическая. Должна быть направлена на своевременное вы­явление и лечение больных урогенитальным хламидиозом. Для профилактики хламидиоза новорожденных беременным женщинам с хла­мидийной инфекцией назначают эритромицин (под контролем врача). К сожалению, закапыва­ние в глаза новорожденным сульфацил-натрия, практикуемое для профилактики бленнореи, а также применение глазных мазей с эритро­мицином и тетрациклином не защищают от хламидийного конъюнктивита. Немаловажное значение имеет соблюдение правил личной ги­гиены, использование презервативов при по­ловом контакте и выполнение других мероп­риятий, рекомендованных для профилактики ЗППП.

Специфическая профилактика. Не разработана.

№ 25 Возбудитель хламидиозов. Таксономия. Характеристи­ка. Микробиологическая диагностика. Лечение.
Таксономия: порядок Chlamydiales, семейство Chlamydaceae, род Chlamydia. Род представлен видами С.trachomatis, C.psittaci,C.pneumoniae.
Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами . Заболевания, вызываемые C. trachomatis uC. pneumoniae , - антропонозы. Орнитоз, возбудителем которого являет­ся С. psittaci , - зооантропонозная инфекция.
Морфология хламидий : мелкие, грам «-» бактерии, шаровидной формы. Не образуют спор, нет жгутиков и капсулы. Клеточная стенка: 2-х слойная мембрана. Имеют гликолипиды. По Граму – красный цвет. Основной метод окраски – по Романовскому – Гимзе.
2 формы существования: элементарные тельца (неактивные инфекционные частицы, вне клетки); ретикулярные тельца (внутри клеток, вегетативная форма).
Культивирование: Можно размножать только в живых клетках. В желточном мешке развивающихся куриных эмбрионов, организ­ме чувствительных животных и в культуре кле­ток
Ферментативная активность : небольшая. Ферментируют пировиноградную кис­лоту, синтезируют липиды. Не способны синтезировать высокоэнергетические соединения.
Антигенная структура : Ан­тигены трех типов: родоспецифический термостабильный липополисахарид (в клеточной стенке). Выявля­ют с помощью РСК; видоспецифический антиген белковой природы (в наружной мембране). Обнаруживают с помощью РИФ; вариантоспецифический антиген белко­вой природы.
Факторы патогенности. С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец. Хламидии образуют эндотоксин. У некоторых хламидий обна­ружен белок теплового шока, способный вызывать аутоиммунные реакции.
Резистентность . Высокаяк различным факторам внешней среды. Устойчивы к низким температурам, высушиванию. Чувствительны к нагреванию.
С. trachomatis - возбудитель забо­леваний мочеполовой системы, глаз и респи­раторного тракта человека.
Трахома - хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся пораже­нием конъюнктивы и роговицы глаз. Антропоноз. Передается контактно- бытовым путем.
Патогенез: поражает сли­зистую оболочку глаз. Он проникает в эпителий конъюнктивы и роговицы, где размножается, разрушая клетки. Развивается фолликулярный кератоконъюнктивит.
Диагностика: исследование соскоба с конъюнкти­вы. В пораженных клетках при окраске по Романовскому-Гимзе обнаруживают цитоплазматические включения фиолетового цвета, расположенные около ядра - тельца Провачека. Для выявления специфического хламидийного антигена в пораженных клетках применяют также РИФ и ИФА. Иногда при­бегают к культивированию хламидий трахомы на куриных эмбрионах или культуре клеток.
Лечение: антибиотики (тетра­циклин) и иммуностимуляторы (интерферон).
Профилактика: Неспецифическая.
Урогенитальный хламидиоз - заболевание, передающееся половым путем. Это - острое/хро­ническое инфекционное заболевание, ко­торое характеризуется преимущественным поражением мочеполового тракта.
Заражение че­ловека происходит через слизистые оболочки половых путей. Основной механизм зараже­ния - контактный, путь передачи - по­ловой.
Иммунитет : клеточный, с сыворотке инфицированных – специфические антитела. После перенесенного заболевания - не формируется.
Диагностика : При забо­леваниях глаз применяют бактериоскопический метод - в соскобах с эпителия конъюнктивы выявляют внутриклеточные включения. Для выявления антигена хламидии в пора­женных клетках применяют РИФ. При поражении мочеполового тракта может быть применен биологический метод, основанный на заражении ис­следуемым материалом (соскобы эпителия из уретры, влагалища) культуры клеток.
Постановка РИФ, ИФА позволяют обнаружить антигены хламидии в исследуемом материале. Серологический метод - для обнаружения IgM против С. trachomatis при диагностике пневмонии новорожденных.
Лечение. антибиоти­ки (азитромицин из группы макролидов), иммуномодуляторы, эубиотики.
Профилактика . Только неспецифическая (лечение больных), соблюдение личной гигиены.
Венерическая лимфогранулема - заболева­ние, передающееся половым путем, характеризуется поражением половых орга­нов и регионарных лимфоузлов. Механизм заражения - контакт­ный, путь передачи - половой.
Иммунитет: стойкий, клеточный и гуморальный иммунитет.
Диагностика: Материал для исследования - гной, биоптат из пораженных лимфоузлов, сыворот­ка крови. Бактериоскопический метод, биологический (культивирование в желточном мешке куриного эмбриона), серологический (РСК с парными сыворотками положительна) и аллергологический (внутрикожная проба с аллергеном хламидии) методы.
Лечение .Антибиотики - макролиды и тетрациклины.
Профилактика : Неспецифическая.
С. pneumoniae - возбудитель респира­торного хламидиоза, вызывает острые и хронические бронхиты и пневмонии. Антропоноз. Заражение – воздушно-капельным путем. Попадают в легкие через верхние дыхательные пути. Вызывают воспаление.
Диагностика: постановка РСК для обнаружения специ­фических антител (серологический метод). При первичном заражении учитывают обнаружение IgM. Применяют также РИФ для обнаружения хламидийного антигена и ПЦР.
Лечение: Проводят с помощью антибиоти­ков (тетрациклины и макролиды).
Профилактика :Неспецифическая.
С. psittaci - возбудитель орнитоза - острого инфекционного заболевания, которое характеризуется пора­жением легких, нервной системы и паренхиматозных органов (печени, селе­зенки) и интоксикацией.
Зооантропоноз. Источники инфекции – птицы. Механизм заражения – аэрогенный, путь передачи – воздушно- капельный. Возбудитель – через слиз. оболочки дыхат. путей, в эпителий бронхов, альвеол, размножается, воспаление.
Диагностика: Материа­л для исследования - кровь, мокрота больного, сыворотка крови для серологического исследования.
Применяют биологический метод - куль­тивирование хламидий в желточном мешке куриного эмбриона, в культуре клеток. Серологический метод. Применяют РСК, РПГА, ИФА, ис­пользуя парные сыворотки крови больного. Внутрикожная аллергическая проба с орнитином.
Лечение : антибиотики (тетрациклины, макролиды).

Название "хламидия" (от греч. chtamys - мантия) отражает наличие оболочки вокруг микробных частиц.

Chlamydia trachomatis и Chlamydia pneumoniae отнесены к безусловно патогенным для человека микроорганизмам и являются возбудителями антропогенных хламидиозов. В зависимости от вида возбудителя и входных ворот (дыхательные пути, мочеполовая система) выделяют респираторные и урогенитальные хламидиозы.

Описано более 20 нозологических форм, вызванных Chlamydia trachomatis, среди них трахома, конъюнктивит, паховый лимфогранулематоз, синдром Рейтера, урогенитальные хламидиозы, вызываемые Chlamydia trachomatis инфекции, по оценкам ВОЗ занимают второе место среди заболеваний, передаваемых половым путем , после трихомонадных инфекции. Ежегодно во всем мире регистрируется около 50 млн заболевших.

Chlamydophila pneumonia вызывает тяжелую пневмонию, заболевание верхних дыхательных путей. Высказываются предположения об участии Chlamydophila pneumonia в развитии атеросклероза и бронхиальной астмы.

Морфологические и тинкториальные свойства хламидий

Хламидии - мелкие грамотрицательные бактерии шаровидной или овоидной формы. Не имеют жгутиков и капсулы. Основным методом выявления хламидий является окраска по Романовскому-Гимзе. Цвет окраски зависит от стадии жизненного цикла: элементарные кольца окашиваются в пурпурный цвет на фоне голубой цитоплазмы клетки, ретикулярные тельца окрашиваются в голубой цвет.

Строение клеточной стенки напоминает таковую грамотрицательных бактерий, хотя имеются отличия. Она не содержит типичною пептидогликана: в его составе полностью отсутствует N-ацетилмурамовая кислота. В состав клеточной стенки входит наружная мембрана, которая включает в себя ЛПС и белки Несмотря на отсутствие пептидогликана, клеточная стенка хламидий обладает ригидностью. Цитоплазма клетки ограничена внутренней цитоплазматической мембраной.

Анализ наружной мембраны (НМ) хламидий показал, что в ее состав входят ЛПС, основной белок наружной мембраны (МОМР). А также богатые цистеином белки Ompl и OmpЗ, связанные с внутренней поверхностью НМ. ЛПС и МОМР Chlamydia psittaci и Chlamydia trachomatis, в отличие ог МОМР Chlamydia pneumoniae, локализуются на наружной поверхности клетки. Здесь же располагаются белки Omp Chlamydia psittaci и Chlamydia pneumoniae с молекулярной массой 90-100 кД.

Хламидий полиморфны, что связано с особенностями их репродукции. Уникальный (двухфазный) цикл развития хламидий характеризуется чередованием двух различных форм существования - инфекционной формы (элементарные тельца - ЭТ) и вегетативной формы (ретикулярные, или инициальные, тельца - РТ).

Микроорганизмы содержат РНК и ДНК. В РТ РНК в 4 раза больше, чем ДНК. В этих содержание эквивалентно.

Ретикулярные тельца могут быть овальной, полулунной формы, в виде биполярных палочек и коккобацилл, размером 300-1000 нм. Ретикулярные тельца не облагают инфекционными свойствами и, подвергаясь делению, обеспечивают репродукцию хламидий.

Элементарные тельца овальной формы, размером 250-500 нм, обладают инфекционными свойствами, способны проникать в чувствительную клетку, где и происходит цикл развития. Они обладают плотной наружной мембраной, что делает их устойчивыми во внеклеточной среде.

Культивирование хламидий

, , , , , , , , , ,

Антигенная структура хламидий

Хламидии имеют антигены трех типов: специфический антиген (общий у всех видов хламидии) - ЛПС; инфоспецифический антиген (различный у всех видов хламидии) - белковой природы, расположенный в наружной мембране; типоспецифический (различный у сероваров Chlamydia trachomatis) - ЛПС, плодящийся в клеточной стенке микроорганизма; вариантоспецифический антиген белковой природы.

Серовары А, В, и С называются глазными, так как они вызывают трахому, серовары D, Е, К, О, Н, I, J, К (гениальные) являются возбудителями урогенитального хламидиоза и его осложнений, серовар L - возбудитель венерических лимфогрануломатозов. Возбудитель респираторного хламидиоза Chlamydia pneumoniae имеет 4 серовара: TWAR, AR, RF, CWL. Chlamydia psittaci имеет 13 сероваров.

, , , , , , , , , ,

Клеточный тропизм хламидий

Chlamydia trachomatis имеет тропизм к слизистой оболочке эпителия урогенитального тракта, причем может оставаться локально на ней или распространяться по всей поверхности ткани. Возбудитель венерической лимфогранулемы имеет тропизм к лимфоидной ткани.

Chlamydia pneumoniae размножается в альвеолярных макрофагах, моноцитах и эндотелиальных клетках сосудов; возможно также системное распространение инфекции.

Chlamydia psittaci вызывают инфекцию в различных типах клеток, включая мононуклеарные фагоциты.

, , , , , ,

Цикл развития хламидий

Цикл развития хламидий продолжается 40-72 часа и включает две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования.

На первом этапе инфекционного процесса происходит адсорбция элементарных телец хламидий на плазмолемме чувствительной клетки хозяина при участии электростатических сил. Внедрение хламидий в клетку происходит путем эндоцитоза. Участки плазмолеммы с адсорбированными на них ЭТ инвагинируются в цитоплазму с образованием фагоцитарных вакуолей. Этот этап длится 7-10 ч.

Далее в течение 6-8 ч происходит реорганизация инфекционных элементарных телец в метаболически активные неинфекционные, вегетативные, внутриклеточные формы - РТ, которые многократно делятся. Эти внутриклеточные формы, представляющие собой микроколонии, называются хламидийными включениями. В течение 18-24 ч развития они локализованы в цитоплазматическом пузырьке, образованном из мембраны клетки хозяина. Во включении может содержаться от 100 до 500 ретикулярных телец хламидий.

На следующем этапе в течение 36-42 ч происходят созревание (образование промежуточных телец) и трансформация ретикулярных телец путем деления в элементарных тельцах. Разрушая инфицированную клетку. Элементарные тельца выходят из нее. Находящиеся внеклеточно, элементарные тельца через 40-72 часа проникают в новые клетки хозяина, и начинается новый цикл развития хламидий.

Помимо такого репродуктивного цикла, в неблагоприятных условиях реализуются и другие механизмы взаимодействия хламидий с клеткой хозяина. Это деструкция хламидий в фагосомах, L-подобная трансформация и персистенция.

Трансформированные и персистируюшие формы хламидий способны реверсировать в исходные (ретикулярные) формы с последующим преобразованием в элементарные тельца.

Вне клеток хозяина метаболические функции сведены к минимуму.

, , , , , ,

Факторы патогенности хламидий

Адгезивные свойства хламидий обусловлены белками наружной мембраны клеток, которые обладают также антифагоцитарными свойствами. Кроме того, микробные клетки имеют эндотоксины и продуцируют экзотоксины. Эндотоксины представлены ЛПС, во многом аналогичными ЛПС грамотрицательных бактерий. Термолабильность субстанции составляют экзотоксины, они присутствуют у всех и вызывают гибель мышей после внутривенного введения.

У хламидий обнаружено наличие секреторной системы III типа, через которую происходит инъекция хламидийных белков в цитоплазму клетки хозяина, как составной элемент инфекционного процесса.

Белок теплового шока (HSP) обладает свойствами вызывать аутоиммунные реакции.